一种酯酶全细胞催化剂及其制备和应用
技术特征：
1. 一种羧酸酯酶突变体，其特征在于，所述羧酸酯酶突变体在seq id no.1所示氨基酸序列上发生如下突变：第236位甘氨酸替换为缬氨酸，第417位精氨酸替换为苯丙氨酸，第545位苏氨酸替换为丙氨酸，所述羧酸酯酶突变体的氨基酸序列如seq id no.2所示。
2. 一种编码如权利要求1所述的羧酸酯酶突变体的多核苷酸，其特征在于：所述多核苷酸的核苷酸序列如seq id no.3所示。
3.一种携带如权利要求2所述核苷酸序列的重组载体。
4.根据权利要求3所述的一种重组载体，其特征在于：所述重组载体含有t7启动子。
5.一种酯酶全细胞催化剂，其特征在于：所述酯酶全细胞催化剂为能够表达如权利要求1所述的羧酸酯酶突变体的重组细胞。
6. 根据权利要求5所述的一种酯酶全细胞催化剂，其特征在于：所述重组细胞携带如seq id no.2所示的核苷酸序列，或携带如权利要求3或4所述的重组载体。
7.一种重组细胞的构建方法，其特征在于：将如权利要求3或4所述的重组载体转化至宿主菌中，得到重组细胞。
8.一种如权利要求5所述的一种酯酶全细胞催化剂在制备右旋反式菊酸中的应用。
9.一种右旋反式菊酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
技术总结
本发明公开了一种酯酶全细胞催化剂及其制备和应用，所述酯酶全细胞催化剂能够表达本发明公开的羧酸酯酶突变体，该羧酸酯酶突变体在SEQID NO.1所示的氨基酸序列上发生如下突变：第236位甘氨酸替换为缬氨酸，第417位精氨酸替换为苯丙氨酸，第545位苏氨酸替换为丙氨酸。本发明有效解决了现有技术中用于拆分菊酸甲酯的升温催化剂的催化活性低，以及产物耐受性差的问题。本发明的酯酶全细胞催化剂，显著提高了其选择性拆分菊酸甲酯制备右旋反式菊酸的活性，光学纯度可达99%以上。并且，本发明公开的羧酸酯酶突变体可在细胞上清中可溶性表达，可通过微生物发酵进行大规模生产，反应条件温和，操作过程简便，更适用于工业生产。
技术研发人员：薛亚平,沈其,汪梦男,郑裕国
受保护的技术使用者：浙江工业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/11/26
文档序号 :
【 40124862 】
技术研发人员：薛亚平,沈其,汪梦男,郑裕国
技术所有人：浙江工业大学
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
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