同时检测CAP和KANA的荧光响应传感体系、制备方法和应用
技术特征：
1.同时检测cap和kana的荧光响应传感体系，其特征在于，所述传感体系包括经kana-aptamer及其互补序列cdna1、cap-aptamer及其互补序列cdna2修饰的fe3o4@au纳米粒；其中，cdna1序列为seq id no.1，kana-aptamer序列为seq id no.2，cdna2序列为seq idno.3，cap-aptamer序列为seq id no.4。
2.根据权利要求1所述的同时检测cap和kana的荧光响应传感体系，其特征在于，所述传感体系包括两端分别修饰荧光基团cy5和猝灭基团bhq3的发卡结构h1，发卡结构h2，及两端分别修饰荧光基团fam和猝灭基团bhq1的发卡结构h3；其中，h1序列为seq id no.5，h2序列为seq id no.6，h3序列为seq id no.7。
3.权利要求1或2所述同时检测cap和kana的荧光响应传感体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的同时检测cap和kana的荧光响应传感体系的制备方法，其特征在于，s1中fecl3·6h2o、ch3coona和组氨酸的物质的量比为1:18-24:4-8，fecl3·6h2o与乙二醇的配比为每1mmol的fecl3·6h2o对应40ml乙二醇溶液；反应温度为200-240℃，反应时间为12-16h，大量乙醇清洗后在60℃条件下干燥。
5.根据权利要求3所述的同时检测cap和kana的荧光响应传感体系的制备方法，其特征在于，s2中haucl4溶液和柠檬酸钠溶液的浓度比为1:1，体积比为40:1。
6.根据权利要求3所述的同时检测cap和kana的荧光响应传感体系的制备方法，其特征在于，s3中氨基化的fe3o4磁珠质量浓度为10-25mg/ml，与加入的aunps溶液的体积比为1:100。
7.根据权利要求3所述的同时检测cap和kana的荧光响应传感体系的制备方法，其特征在于，s4中dna溶液浓度为1-10μm，使用终浓度为0.1-2μm，两种dna溶液按体积比1:1混合；fe3o4@au nps溶液和dna溶液的体积比为4:1。
8.权利要求1或2所述的同时检测cap和kana的荧光响应传感体系在检测食品中微量氯霉素和卡那霉素中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，具体步骤为：
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，荧光响应传感体系对氯霉素的检测限低至28.03am、对卡那霉素的检测限低至32.03am，线性范围均为0.1fm-1nm。
技术总结
本发明公开了同时检测CAP和KANA的荧光响应传感体系、制备方法和应用，所述传感体系包括经KANA‑Aptamer及其互补序列cDNA1、CAP‑Aptamer及其互补序列cDNA2修饰的Fe<subgt;3</subgt;O<subgt;4</subgt;@Au纳米粒；其中，cDNA1序列为SEQ ID NO.1，KANA‑Aptamer序列为SEQ ID NO.2，cDNA2序列为SEQ ID NO.3，CAP‑Aptamer序列为SEQ ID NO.4。优势在于：(1)本发明借助磁分离特性实现分析物富集，有效实现分析物从复杂基质中分离富集，简化前处理步骤；(2)通过适配体的选择可以实现多种抗生素特异性检测，同时借助核酸放大技术能够大幅提高检测方法准确度和灵敏度，适用于超微量多种抗生素的检测；(3)将抗生素含量转化为荧光仪器的荧光强度值，检测方法操作简单便捷，检测迅速。使用荧光光谱仪进行荧光信号检测，卡那霉素和氯霉素检出限低至32.03aM和28.03aM，线性范围为0.1fM‑1nM。
技术研发人员：孔德昭,沈卓越,陈一桐,唐盛,沈薇,刘畅,史巧巧,李雅琪,张琪,李诗洁
受保护的技术使用者：江苏科技大学
技术研发日：
技术公布日：2024/11/21
技术研发人员：孔德昭,沈卓越,陈一桐,唐盛,沈薇,刘畅,史巧巧,李雅琪,张琪,李诗洁
技术所有人：江苏科技大学
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