针对人TIM-3和人CD39的双特异性抗体和其用途的制作方法

1.一种异二聚体型的抗体或抗体衍生物，其为两种不同的半分子的组合，其具有：对tim-3抗原具有结合性的半分子和对cd39抗原具有结合性的半分子。

2.根据权利要求1所述的抗体或抗体衍生物，其具有增强对癌细胞的免疫活性的作用。

3.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体衍生物，其中，对tim-3抗原具有结合性的半分子为含有选自由下述组成的组中的任意的重链/轻链的互补决定区的抗体的半分子或抗体衍生物的半分子：

4.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体衍生物，其中，对cd39抗原具有结合性的半分子为含有选自由下述组成的组中的任意的重链/轻链的互补决定区的抗体的半分子或抗体衍生物的半分子：

5.根据权利要求3所述的抗体或抗体衍生物，其中，对tim-3抗原具有结合性的半分子为(1-1)或(1-5)的半分子。

6.根据权利要求4所述的抗体或抗体衍生物，其中，对cd39抗原具有结合性的半分子为(2-1)、(2-3)～(2-7)中的任意半分子。

7.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体衍生物，其中，对tim-3抗原具有结合性的半分子的重链可变区vh结构域的氨基酸序列选自由下述组成的组：

8.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体衍生物，其中，对tim-3抗原具有结合性的半分子的轻链可变区vl结构域的氨基酸序列选择由下述组成的组：

9.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体衍生物，其中，抗体衍生物的对tim-3抗原具有结合性的半分子选自构成单链fv抗体(scfv)的半分子的可变区为：

10.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体衍生物，其中，对cd39抗原具有结合性的半分子的重链可变区vh结构域的氨基酸序列选自由下述组成的组：

11.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体衍生物，其中，对cd39抗原具有结合性的半分子的轻链可变区vl结构域的氨基酸序列选自由下述组成的组：

12.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体衍生物，其中，抗体衍生物的对cd39抗原具有结合性的半分子选自构成单链fv抗体(scfv)的半分子的可变区为：

13.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体衍生物，其中，抗体衍生物选自抗体改变体或其功能性片段，所述抗体改变体或其功能性片段选自人源化抗体、嵌合抗体、单链fv抗体(scfv抗体)、fab、fab’、f(ab’)2、fc效应功能改变抗体、igg1lala、igg1_n297a、igg4_s228p。

14.根据权利要求13所述的抗体或抗体衍生物，其中，免疫活性的增强为t细胞的活化，所述t细胞的活化选自由除去免疫抑制信号、解除t细胞耗竭、使t细胞增殖、提高t细胞对癌细胞的细胞杀伤性、促进t细胞分泌细胞因子、活化t细胞的肿瘤浸润的亢进、促进树突细胞(dc)成熟、促进树突细胞介导的抗原特异性t细胞的活化和使树突细胞介导的t细胞的肿瘤细胞杀伤活性亢进组成的组。

15.根据权利要求13所述的抗体或抗体衍生物，其诱导对癌细胞的细胞杀伤性，但是不诱导对正常细胞的细胞杀伤性。

16.根据权利要求13所述的抗体或抗体衍生物，其中，癌细胞选自由血液癌、黑素瘤、乳腺癌、肺癌、大肠癌、胃癌、胰腺癌、肝癌组成的组。

17.一种用于治疗癌的药物组合物，其包含异二聚体型的抗体或抗体衍生物，所述异二聚体型的抗体或抗体衍生物为两种不同的半分子的组合，其具有：对tim-3抗原具有结合性的半分子和对cd39抗原具有结合性的半分子。

18.根据权利要求17所述的药物组合物，其中，癌选自由血液癌、黑素瘤、乳腺癌、肺癌、大肠癌、胃癌、胰腺癌、肝癌组成的组。

19.一种测定对癌细胞的细胞杀伤性的方法，其包括下述工序：

20.根据权利要求19所述的测定对癌细胞的细胞杀伤性的方法，其中，在同一被检体的外周血淋巴细胞存在下，测定癌细胞的细胞存活率是否降低或源自外周血淋巴细胞的免疫细胞是否得到活化。

21.根据权利要求19或20所述的测定对癌细胞的细胞杀伤性的方法，其中，根据对从被检体采集的癌细胞的体外的细胞杀伤性来测定将异二聚体型的抗体或抗体衍生物给药于该被检体时对癌细胞的细胞杀伤性的亢进，所述异二聚体型的抗体或抗体衍生物为两种不同的半分子的组合，其具有：对tim-3抗原具有结合性的半分子和对cd39抗原具有结合性的半分子。

22.根据权利要求19或20所述的测定对癌细胞的细胞杀伤性的方法，其中，根据体外的免疫活化物质的分泌亢进来测定将异二聚体型的抗体或抗体衍生物给药于该被检体时对癌细胞的细胞杀伤性的亢进，所述异二聚体型的抗体或抗体衍生物为两种不同的半分子的组合，其具有：对tim-3抗原具有结合性的半分子和对cd39抗原具有结合性的半分子。

23.一种测定试剂盒，其用于在体外测定异二聚体型的抗体或抗体衍生物对从被检体采集的癌细胞的细胞杀伤性、免疫活化物质的分泌或免疫细胞的活化，所述测定试剂盒含有异二聚体型的抗体或抗体衍生物，所述异二聚体型的抗体或抗体衍生物为两种不同的半分子的组合，其具有：对tim-3抗原具有结合性的半分子和对cd39抗原具有结合性的半分子。