一种细胞色素P450BM3突变体及其在区域选择性高效降解4-氯苯酚中的应用
技术特征:
1.一种细胞色素p450bm3突变体,其特征在于,所述突变体是将seq id no.1所示氨基酸序列第51位、第82位、第330位至少有一个氨基酸进行置换;第51位酪氨酸tyr突变为缬氨酸val;第82位丙氨酸ala突变为甲硫氨酸met,第330位丙氨酸ala突变为苯丙氨酸phe。
2.根据权利要求1所述细胞色素p450bm3突变体,其特征在于,所述突变体包括y51v、a82m、a330f、y51v+a82m、y51v+a330f、a82m+a330f或y51v+a82m+a330f。
3.一种编码权利要求1~2任一项所述细胞色素p450bm3突变体蛋白的基因。
4.一种含有权利要求3所述基因的重组质粒。
5.根据权利要求4所述重组质粒,其特征在于,所述重组质粒的表达载体为pet系列表达载体。
6.一种携带权利要求3所述突变体的基因或权利要求4所述重组质粒的重组菌。
7.根据权利要求6所述重组菌,其特征在于,所述宿主为大肠杆菌c43(de3)或bl21(de3)。
8.一种权利要求1或2所述的细胞色素p450bm3突变体或权利按要求4所述重组质粒或权利要求6所述的重组菌在降解4-氯苯生成4-氯邻苯二酚中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述应用包括如下步骤:以细胞色素p450bm3突变体为催化剂,4-氯苯酚为底物,催化4-氯苯酚生成4-氯对苯二酚。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述的催化的反应条件为:ph 6~8,温度20~45℃。
技术总结
本发明公开了一种细胞色素P450BM3突变体及其在区域选择性高效降解4‑氯苯酚中的应用,所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第51位、第82位、第330位至少有一个氨基酸进行置换;第51位酪氨酸Tyr突变为缬氨酸Val;第82位丙氨酸Ala突变为甲硫氨酸Met、第330位丙氨酸Ala突变为苯丙氨酸Phe。本发明使用定向进化的手段对细胞色素P450BM3进行改造,获得了具有高区域选择性(>99%)和4‑氯苯酚降解活性提高的P450BM3突变体。
技术研发人员:任鑫坤,王骞,王瑾丰,曲展,朱博阳,牛善远
受保护的技术使用者:南京大学
技术研发日:
技术公布日:2024/11/14
文档序号 :
【 40001934 】
技术研发人员:任鑫坤,王骞,王瑾丰,曲展,朱博阳,牛善远
技术所有人:南京大学
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
声 明 :此信息收集于网络,如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们,我们会在第一时间删除
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