一种杂交枫香磺肽素依赖性营养器官起源体胚的发生方法
技术特征:
1.一种杂交枫香磺肽素依赖性营养器官起源体胚的发生方法,其特征是,将杂交枫香的成熟营养器官作为外植体,于愈伤组织诱导培养基上进行诱导培养,获得的愈伤组织再于体胚诱导培养基中进行诱导培养,获得体胚,其中,所述的体胚诱导培养基中含有磺肽素。
2.如权利要求1所述的发生方法,其特征是,所述的杂交枫香成熟营养器官为叶片、叶柄,优选为叶片。
3.一种获得杂交枫香再生植株的方法,其特征是,包括如下顺序进行的步骤:
4.如权利要求3所述的方法,其特征是,步骤1)中所述愈伤组织诱导培养基为:改良blaydes基本培养基+水解酪蛋白1g/l+蔗糖40g/l+2,4-d 0.5-1.5mg/l+6-ba0.2-0.8mg/l+psk-α0-0.2mg/l+植物凝胶1g/l,ph为5.6~5.7。
5.如权利要求3或4所述的方法,其特征是,还包括步骤1a):愈伤组织增殖培养:将步骤1)诱导培养获得的胚性愈伤组织转接到愈伤组织增殖培养基中,于黑暗条件下进行愈伤组织增殖培养。
6.如权利要求3或4所述的方法,其特征是,步骤2)中所述成熟培养基为:改良blaydes基本培养基+蔗糖40g/l+psk-α0-0.8mg/l(优选为0.2-0.8mg/l),ph为5.6~5.7。
7.如权利要求3或4所述的方法,其特征是,步骤3)中所述体胚诱导培养基为:改良blaydes基本培养基+活性炭1g/l+蔗糖40g/l+psk-α0-0.8mg/l(优选为0.2-0.8mg/l)+植物凝胶6g/l,ph为5.6~5.7。
8.如权利要求3或4所述的方法,其特征是,步骤4)中所述体胚发育培养基为:改良blaydes基本培养基+活性炭1g/l+蔗糖40g/l+psk-α0-0.8mg/l(优选为0.2-0.8mg/l)+植物凝胶3g/l,ph为5.6~5.7。
9.如权利要求3或4所述的方法,其特征是,步骤5)中所述体胚萌发培养基为:wpm基本培养基+蔗糖30g/l+植物凝胶3g/l,ph为5.8~5.9。
技术总结
本发明公开了一种杂交枫香磺肽素依赖性营养器官起源体胚的发生方法,包括将成熟营养器官作为外植体,在含有磺肽素的培养基上进行愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、胚性愈伤组织成熟、体胚诱导、体胚发育,以及在不含磺肽素的培养基上进行体胚萌发,共六个部分。本发明利用新型植物小肽磺肽素在高胚性基因型和低胚性基因型都实现了杂交枫香叶片起源子叶胚的诱导,并且证明磺肽素可以显著提高叶片愈伤组织诱导率、子叶胚形成率和萌发率,不仅对于后续的理论探究提供了稳定高效的体系,且对于杂交枫香无性系林业的发展奠定了坚实的基础。
技术研发人员:张金凤,包芬
受保护的技术使用者:北京林业大学
技术研发日:
技术公布日:2024/12/2
技术研发人员:张金凤,包芬
技术所有人:北京林业大学
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
声 明 :此信息收集于网络,如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们,我们会在第一时间删除