一种芦竹丛生芽EMS诱变育种方法

本发明涉及诱变育种，具体涉及一种芦竹丛生芽ems诱变育种方法。

背景技术：

1、芦竹为禾本科芦竹属多年生大型草本植物，其外形既像芦苇又像竹子，丛生，一年内多次发笋，具有粗而多节的根状茎，生物量大，适应性强，是当今重要的能源植物之一。

2、芦竹耐低温、干旱，在我国北方零下28℃条件下也能够安全越冬，具有较强的耐盐碱、耐旱性，比较适合在盐碱地种植。芦竹长势高大挺拔，除做河岸、湖边等处观赏植物之外，还可以固坡护堤、防沙固沙，是荒漠化地区恢复植被的优良草种；越来越多的研究表明，芦竹对重金属污染的土壤、湿地及废水等具有净化、修复的功效，可以作为植物修复技术中的重要植物资源。

3、然而芦竹无法靠种子繁育，只能通过无性繁殖进行扩繁，选用适当的植物激素，利用组织培养方法进行芦竹的繁殖，可实现芦竹的快速繁殖。但现有技术中还未有关于采用ems诱变芦竹丛生芽的育种方法报道。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本发明提供了一种芦竹丛生芽ems诱变育种方法，操作简便，方法成熟、稳定，育种周期短。

2、为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

3、一种芦竹丛生芽ems诱变育种方法，包括以下步骤：

4、s1、选取带腋芽的茎秆作为外植体，节下预留0.6～1cm斜切，节上预留1cm平切，得外植体材料；

5、s2、将步骤s1所得的外植体材料进行消毒处理；

6、s3、将经过消毒处理的外植体接种于不定芽诱导培养基中，置于光照培养室，扩繁培养，得到丛生芽组培苗；

7、s4、取一部分步骤s3所得的丛生芽组培苗进行ems诱变处理，剩余步骤s3所得的丛生芽组培苗不进行ems诱变处理，作为对照组；

8、s5、对经过ems诱变处理的组培苗和对照组的组培苗，在整个生长过程中观察并标记与对照组叶片表型和分蘖数有明显差异(叶片出现皱缩，分蘖数减少)的突变表型，记为诱变初突变体；

9、s6、将步骤s5所得的诱变初突变体单株进行丛生芽扩繁培养，得到目标突变体株系。

10、进一步地，所述的步骤s2中，采用次氯酸钠或氯化汞进行外植体消毒。

11、进一步地，所述的步骤s3中，不定芽诱导培养基采用含有0.7％琼脂粉、3％蔗糖、6-ba浓度为4mg/l，iba浓度为1mg/l的ms培养基。

12、进一步地，所述的步骤s3中，培养条件为：温度25℃，光照时间为16h，光照强度为18000～20000lux，湿度为60％。

13、进一步地，所述的步骤s4中，ems诱变处理时，设置0.1、0.3和0.5mol/l3个梯度的ems浓度和2、4、6h3个时间处理，共12个处理组合。

14、本发明提供了一种芦竹丛生芽ems诱变育种方法，明确了离体茎段部位、规格及诱变方法，提高了芦竹的突变率，通过丛生芽扩繁缩短了芦竹的育种周期，克服了芦竹自然突变育种周期长、育种效率低、变异少的缺陷。此方法可以对芦竹诱变材料进行早期筛选和快速得到无性繁殖的稳定遗传突变体，操作方便，对芦竹新品种的选育具有重要意义。

1.一种芦竹丛生芽ems诱变育种方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种芦竹丛生芽ems诱变育种方法，其特征在于，所述的步骤s2中，采用次氯酸钠或氯化汞进行外植体消毒。

3.如权利要求1所述的一种芦竹丛生芽ems诱变育种方法，其特征在于，所述的步骤s3中，不定芽诱导培养基采用含有0.7％琼脂粉、3％蔗糖、6-ba浓度为4mg/l，iba浓度为1mg/l的ms培养基。

4.如权利要求1所述的一种芦竹丛生芽ems诱变育种方法，其特征在于，所述的步骤s3中，培养条件为：温度25℃，每日光照时间为16h，光照强度为18000～20000lux，湿度为60％。

5.如权利要求1所述的一种芦竹丛生芽ems诱变育种方法，其特征在于，所述的步骤s4中，ems诱变处理时，设置0.1、0.3和0.5mol/l3个梯度的ems浓度和2、4、6h3个时间处理，共12个处理组合。