一种Claudin-15蛋白的检测方法及其相关产品和应用与流程

本发明涉及生物领域，具体而言，涉及一种claudin-15蛋白的检测方法及其相关产品和应用。

背景技术：

1、人封闭蛋白15(claudin-15，cldn15)是四次跨膜蛋白，包括四个跨膜结构域(tm1-4)、细胞内n端和c末端以及两个细胞外环(ecl1和ecl2)。ecl1包含四条β链和一条胞外螺旋(ech)，ecl2包含一条β链和一个细胞表面暴露的部分跨膜结构域。

2、claudin-15在健康成人的肠道上皮高表达，在乳糜泄含麦胶饮食(gcf)患者的结肠肠道上皮表达量显著上升。由于它是膜结构蛋白，一般不溶解在粪便上清液中，目前，对claudin-15的检测主要是免疫组织化学方法对肠上皮的切片进行免疫组织化学检测或检测肠道内容物中的claudin-15基因产物。但免疫组织化学检测是侵入性的，需要内镜下取肠黏膜组织活检，应用范围受到限制；分子检测方法由于需要定量pcr仪，并且需要在专门的pcr实验室里进行检测，受到检测场地的严格限制。现有的检测过程繁琐，且存在无法准确定量等问题。

3、鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种claudin-15蛋白的检测方法及其相关产品和应用。

2、本发明是这样实现的：

3、第一方面，本发明实施例提供了一种claudin-15蛋白的检测或提取方法，其包括采用萃取液从粪便样本中非疾病诊断目的的检测claudin-15或提取claudin-15；所述萃取液的活性成分包括蛋白酶；所述蛋白酶包括以下任意一种：组织蛋白酶s；颗粒酶m和卡利克雷因相关蛋白酶15。

4、第二方面，本发明实施例提供了一种试剂组合或试剂盒，所述试剂组合或试剂盒包括：前述实施例中所述的萃取液。

5、第三方面，本发明实施例提供了试剂组合在制备用于检测claudin-15或提取claudin-15的产品或用于辅助诊断claudin-15水平异常相关的疾病的产品中的应用。

6、本发明具有以下有益效果：

7、本发明通过特殊的萃取液配方，能够从粪便样本中有效提取claudin-15蛋白，使其溶解在粪便上清液中，从而实现从粪便样本中检测目标蛋白claudin-15，在无需特殊设备的情况下，实现claudin-15蛋白的无侵入性的有效检测。

1.一种claudin-15蛋白的检测或提取方法，其特征在于，其包括采用萃取液从粪便样本中非疾病诊断目的的检测claudin-15或提取claudin-15；所述萃取液的活性成分包括蛋白酶；所述蛋白酶包括以下任意一种：组织蛋白酶s；颗粒酶m和卡利克雷因相关蛋白酶15。

2.根据权利要求1所述的检测或提取方法，其特征在于，在所述萃取液中，所述组织蛋白酶s的终浓度为0.02~10ng/ml；

3.在所述萃取液中，所述卡利克雷因相关蛋白酶15的终浓度为0.03~12ng/ml。

4.根据权利要求1~2任一项所述的检测或提取方法，其特征在于，所述萃取液还包括：缓冲液、二硫苏糖醇和表面活性剂中的任意一种或多种；

5.根据权利要求1~3任一项所述的检测或提取方法，其特征在于，所述检测claudin-15的步骤包括：将所述萃取液与待测样本混合，对混合后的产物离心、沉淀或过滤，取上清液用于检测。

6.根据权利要求4所述的检测或提取方法，其特征在于，所述检测的方法包括：酶联免疫法、免疫层析法、化学发光法和免疫比浊法中的任意一种。

7.根据权利要求4所述的检测或提取方法，其特征在于，所述取上清液用于检测的步骤还包括：采用捕获抗体捕获靶标物和/或采用检测抗体检测靶标物的信号；

8.一种试剂组合或试剂盒，其特征在于，所述试剂组合或试剂盒包括：权利要求1~6任一项中所述的萃取液。

9.根据权利要求7所述的试剂组合或试剂盒，其特征在于，所述试剂组合或试剂盒还包括：权利要求6中所述的抗原多肽和/或权利要求6中所述的捕获抗体和/或检测抗体。

10.试剂组合在制备用于检测claudin-15或提取claudin-15的产品或用于辅助诊断claudin-15水平异常相关的疾病的产品中的应用。