CMB磁珠试剂盒及其在半胱氨酸修饰蛋白组学分析中的应用的制作方法
技术特征：
1.cmb磁珠试剂盒，其特征在于，所述磁珠试剂盒由:cmb磁珠，用量0.1-0.2ml/ml样品；n-乙基马来酰亚胺，用量0.8-1ml/ml样品；游离巯基选择性还原剂，用量0.6-0.8ml/ml样品；硫醇类还原剂，用量20-25μl/ml样品；含有百分比浓度为4% sds的pbs缓冲液；pbs缓冲液构成。
2.根据权利要求1所述的cmb磁珠试剂盒，其特征在于，所述cmb磁珠为活化巯基磁珠，该活化巯基磁珠为表面结合有2-吡啶基二硫化物的超顺磁性球体，其中每克cmb磁珠结合25-35μmol的2-吡啶基二硫化物。
3.根据权利要求1所述的cmb磁珠试剂盒，其特征在于，所述cmb磁珠的粒径大小为0.2-0.4μm。
4.根据权利要求1所述的cmb磁珠试剂盒，其特征在于，所述游离巯基选择性还原剂为羟胺和/或抗坏血酸钠。
5.根据权利要求1所述的cmb磁珠试剂盒，其特征在于，所述硫醇类还原剂为三(2-羧乙基)膦。
6.权利要求1-5中任一所述的cmb磁珠试剂盒在半胱氨酸修饰蛋白组学分析中的应用；
7.权利要求1-5中任一所述的cmb磁珠试剂盒在半胱氨酸修饰蛋白组学分析中的应用；
技术总结
本申请涉及生物检测技术领域，具体而言涉及CMB磁珠试剂盒及其在半胱氨酸修饰蛋白组学分析中的应用。CMB磁珠试剂盒，由CMB磁珠；N‑乙基马来酰亚胺；游离巯基选择性还原剂；硫醇类还原剂；含有4% SDS的PBS缓冲液；PBS缓冲液构成。在用于半胱氨酸修饰蛋白组学分析时，操作方法如下：待测蛋白经硫醇类还原剂还原、NEM封闭，丙酮法沉淀得B；B用4% SDS‑PBS复溶，与CMB磁珠孵育后，洗涤反应得特异性蛋白溶液，用于质谱分析/沉淀B酶解、脱盐后，与CMB磁珠孵育，得特异性氧化还原肽段，用于质谱分析。本申请利用CMB磁珠直接结合自由巯基，省略生物素标记步骤，简化流程、缩短时间，利于大样本队列研究，保持高通量稳定检测。
技术研发人员：呼建文,戴捷
受保护的技术使用者：上海拜谱生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/11/26
文档序号 :
【 40125131 】
技术研发人员：呼建文,戴捷
技术所有人：上海拜谱生物科技有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
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