一种化学发光法检测TAT的试剂盒制备方法及其应用与流程
技术特征:
1.一种检测tat的试剂盒,其特征在于,包括:试剂rm、试剂r1,所述r1包括吖啶酯标记的抗凝血酶单抗的工作液,所述吖啶酯为nsp-sa-nhs,结构式:
2.根据权利要求1所述的检测tat试剂盒,其特征在于,还包括缓冲液,所述缓冲液包括na2hpo4、nah2po4、nacl、bsa、casein、海藻糖、proclin。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包括试剂r2,所述试剂r2包括阻断剂的工作液。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,还包括清洗剂,所述清洗剂为pbs。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂rm中凝血酶抗体包被的磁性微球浓度为0.4mg/ml、试剂r1中吖啶酯标记的抗凝血酶抗体浓度为0.1mg/l、试剂r2中阻断剂浓度为0.1mg/ml。
6.一种磁性微球化学发光检测tat的方法,其特征在于,采用如权利要求1~5任一项所述的试剂盒进行检测。
7.根据权利要求6所述的试剂盒的方法,其特征在于,试剂rm、试剂r1、试剂r2采用前处理后再进行检测,所述两步清洗法包括以下步骤:
8.一种吖啶酯用于制备提高吖啶酯-抗凝血酶单抗复合物稳定性的试剂的用途,其特征在于,所述吖啶酯为nsp-sa-nhs,结构式:
9.一种缓冲液用于制备提高磁性微球-凝血酶单抗复合物稳定性的试剂以及吖啶酯-抗凝血酶抗体复合物稳定性的试剂,其特征在于,所述缓冲液包括ph7.2±0.1、5.75g/lna2hpo4、11.5g/l nah2po4、9g/l nacl、10g/l bsa、5g/l casein、20g/l海藻糖、0.3ml/lproclin。
10.一种清洗剂用于制备降低游离抗凝血酶或游离吖啶酯对tat检测的干扰的试剂的用途,其特征在于,所述清洗剂为pbs;所述清洗剂需进行两步清洗,所述两步清洗法包括以下步骤:
技术总结
本发明提供了一种化学发光法检测TAT的试剂盒制备方法及其应用。本发明筛选出一种与抗凝血酶单抗结合最稳定的吖啶酯为NSP‑SA‑NHS;本发明筛选出一种最佳缓冲液配方为Na<subgt;2</subgt;HPO<subgt;4</subgt;、NaH<subgt;2</subgt;PO<subgt;4</subgt;、NaCl、BSA、Casein、海藻糖、Proclin,其增加试剂RM、试剂R1的稳定性,进而提高试剂盒检测TAT的准确性;本发明通过两步两清洗反应流程解决了血液样本中游离抗凝血酶单体对检测TAT的干扰。
技术研发人员:刘晓东,王涛,张艳华,余海鹏,龚庆,洪龙斌
受保护的技术使用者:中翰盛泰生物技术股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/26
技术研发人员:刘晓东,王涛,张艳华,余海鹏,龚庆,洪龙斌
技术所有人:中翰盛泰生物技术股份有限公司
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